作者：李斯
来源：艾兰博曼
问题1：如何处理淋巴结组织从而使其可以进行流式检查。如果做流式的话是否还是需要整个淋巴结或者针吸就足够了？
答：流式细胞仪(FCM)检测是一种自动分析细胞的高新技术。其原理是对处在液流中的单个细胞或其它生物微粒等进行多参数的快速定量分析和分选。因此用于FCM检测的标本必须是单个细胞悬液。组织标本如果要进行流式分析，需要进行预先处理，如：酶消化法、机械分离法（将标本剪碎、过滤、离心）或化学药品处理法。通常流式细胞术可以采用外周血标本、骨髓标本、组织等进行分析，对淋巴瘤的诊断具有辅助作用。针吸标本同样也可以用于流式分析。但是，淋巴瘤的诊断最好能有病理组织学的进一步分析。
问题2：2.1. 关于恶性淋巴瘤的诊断和鉴别诊断，除了增加抗体的选择使用、不断积累判断经验之外，请问国内外有没有新的研究方法或者应用可以提高早期诊断率
答：目前还没有。至今淋巴瘤不提早期诊断，因为目前是不太可能的。
2.2 再请教一个基础的问题，是不是看见了核分裂象，就倾向于判断为恶性？
答：不是！增生性病变也可以由很高核分裂。
问题3：3.1 原发性胃肠道恶性淋巴瘤PGML是否与幽门螺杆菌有关？不同组织学分型与其恶性程度、预后情况的关系如何？有没有相关的研究报道呢？
答：部分胃粘膜相关边缘带B细胞淋巴瘤与幽门螺杆菌有关。而其他很多类型则无关。消化道T细胞淋巴瘤一般都比较恶，而B细胞有不同情况，比如胃粘膜相关边缘带B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、浆细胞瘤等恶性度低，而伯基特淋巴瘤、弥漫大B细胞淋巴瘤恶性度比较高。
3.2 您在幻灯中分类总结了许多的抗体，我想请问，哪些抗体的假阳性、假阴性比较高，需要我们引起注意？另外，除了抗体因素，还有哪些因素可以影响免疫组化结果的特异性呢？
答：抗体本身不是容易产生假阳性或假阴性，因为现在生存下来的公司生产的抗体一般质量都比较好（除了一些新抗体）。主要是因为操作和判断与假阳性或假阴性关系密切。
3.3 再问个低级的问题，恶性组织细胞增生症（恶组）是不是恶性淋巴瘤呢？
答：以前（比如10年或20年前）诊断的恶组，现在看来多数是淋巴瘤，主要是间变性大细胞淋巴瘤，或其他T细胞淋巴瘤。不过也有少数真性组织细胞恶性肿瘤。
问题4：关于淋巴瘤诊断思路的问题，医院收治的淋巴瘤的病医院不知道给过什么样的诊断，用过什么药后才来我们这发现是淋巴瘤。医院在没有更多的辅助诊断的装备的情况下诊断淋巴瘤的思路，怎么去发掘更多确诊淋巴瘤的信息呢？
答：淋巴瘤的诊断是一个综合性的过程，包括对患者临床信息、病理形态、免疫组织化学分析以及分子遗传学的一个综合性判断；医院如果设备欠缺，则需要掌握好患者的临床信息，如果临床病程短，患者年轻，诊断肿瘤时需要特别谨慎。淋巴瘤的诊断，形态学有时可表现为（A）固有结构的消失，（B）单一成片的异型细胞浸润；（C）淋巴结被膜，周围脂肪组织、血管及神经组织被异型淋巴细胞浸润。由于淋巴瘤的类型繁多，很难有一个统一的标本来明确诊断；如果基层医生在诊断上存在疑惑时，医院会诊。
问题5：5.1 浆细胞瘤是不是多发性骨髓瘤？为什么放在淋巴瘤中呢？
答：浆细胞瘤包括以下几个大类：多发性骨髓瘤，孤立性浆细胞瘤（单个骨或软组织浆细胞瘤）和髓外浆细胞瘤（原发于骨髓和骨骼外的浆细胞瘤）。因为浆细胞是B淋巴细胞分化成熟阶段，故归入淋巴瘤内。
5.2 淋巴细胞白血病为什么也放在淋巴瘤中呢？
答：淋巴细胞白血病包括急性和慢性；急性淋巴细胞白血病又包括T淋巴母和B淋巴母细胞型；慢性淋巴细胞白血病又称为B小细胞淋巴瘤/慢性淋巴细胞白血病，后者是因为肿瘤细胞累及血液或骨髓后而称之，来源于淋巴细胞，故仍放在淋巴瘤的范畴。在形态、免疫表型和分子遗传学方面二者均一样，因此，它们的本质一样，只有临床表现不同，所以分类在一起。
5.3 我是医院的临床医生，常常碰到临床上非常像淋巴瘤但多次淋巴结活检均得不到支持。如何能够提高医院的诊断水平方便于病人呢？（同问题4）
答：当然，有两方面的原因，一是标本根本就没有肿瘤，第二是标本有肿瘤病理医生没有看出来或没有勇气诊断。当医院的临床医生高度怀疑淋巴瘤时，可以多次取活检，同时应该主动与病理科医生联系，给他们提供更全面的临床信息。淋巴瘤的诊断具有一定的复杂性，需要基层病理科医生长期学习与积累，必要时，医院进行系统性学习。
问题6：6.1曾有一例，CD30及ALK均为弥漫阳性，但Mum-1亦为弥漫阳性，排除抗体加错原因，这种结果同Mum-1阴性（或散在阳性）者意义有何不同？
答：一般系统性间变大细胞淋巴瘤的肿瘤细胞是可以表达MUM-1。
6.2. 在弥漫的小淋巴细胞背景中出现大细胞密集区域时如何选择抗体。大细胞似乎不如间变细胞大，CD30、CD3均阳性，弥漫小淋巴细胞CD3(+)。
答：在弥漫性小淋巴细胞背景中出现大细胞密集区域，需要考虑以下几种情况：（A）间变大细胞淋巴瘤；（B）霍奇金细胞淋巴瘤，肿瘤细胞较多；（C）生发中心细胞；（D）处于高度活化状态的反应性淋巴细胞。此时，需要做以下几种抗体进行鉴别：CD21（生发中心）、CD30、CD15（霍奇金）、GranzymeB、ALK（大间变）、CD20（强弱不等，提示为反应性）。
6.3 CD30阳性的弥漫大B细胞淋巴瘤有何意义？
答：CD30阳性的弥漫大B细胞淋巴瘤常见于形态学比较间变的弥漫大B细胞淋巴瘤，属于少见类型。
问题7：7.1 一个病人进入病理检查时往往已经是中晚期了，可有早期的分子诊断方法适于实验室检查或健康体检时的特别项目？
答：淋巴瘤的诊断很大程度不同上取决于最终的病理诊断；如何早期诊断淋巴瘤，需要患者经常做体检，身体有不适时，应尽早明确病因。全身CT或B超检查可以大体了解身体是否有肿块或异常；血常规检查对一些淋巴瘤/白血病也有提示。如果发现异常，尽快做活检予以确诊。
7.2 淋巴细胞瘤的分子病理医院都能开展吗？所采用医院间加以引用，可有国家规范？
答：淋巴瘤的分子病理学检查需要紧密的设备和大量的试剂盒，实验室技术和质量控制要求都非常高，医院不一定具有完整的条件。目前还没有全国统一规范和标准。
7.3 慢性炎症与肿瘤间存在联系，淋巴细胞瘤可有像肺癌一样的比较明显的诱发因素？
答：发生于眼部和胃肠道的黏膜相关淋巴组织边缘区B细胞淋巴瘤可能与特殊病菌感染有一定的相关性，比如幽门螺杆菌等。但是，大多数淋巴瘤的病因依旧没能充分认清。相关因素包括慢性炎症、免疫功能异常或自身免疫性疾病，如干燥综合征、桥本氏甲状腺炎等。
问题8：关于Castleman病的诊断，病理诊断方面有何相对特异之处？比如形态或免疫标记？
最近遇到一个发热、淋巴结肿大、皮疹的患者，淋巴结病理有的报“反应性增生”，有的报“Castleman病”。虽然CD也算一种反应性增生，但临床表现不典型时，是否以诊断其它更合适？
答：Castleman病又称为巨大淋巴结病，临床上常表现为淋巴结肿大明显；病理形态学：分为三种类型：透明血管型、浆细胞型和混合型；主要表现为大量萎缩的淋巴滤泡，滤泡生发中心明显缩小，周围套区细胞呈同心圆样排列，部分生发中心内可见小血管植入的现象，似“棒棒糖”样；各种类型的不同在于滤泡间的成分不同，透明血管型主要以大量小血管增生为主；浆细胞型可见较多浆细胞；混合型则具有以上两种特征。单发性Castleman病生物学行为与反应性性增生相似，局部切除即可达到治疗目的；但多中心型Castleman病则需要更加积极的治疗。
问题9：第六张片子有2个小问题：9.1FDC是不是FollicularDendriticCell的缩写啊？
答：FDC是FollicularDendriticCell，中文意思是滤泡树状突细胞。
9.2 第6行（第二个黄圈处）“也常表达”后面是不是有什么内容漏掉了啊？
答：第6行（第二个黄圈处）“也常表达”后面应加上EMA。
问题10：临床中有时多次淋巴结活检，病理均不支持淋巴瘤，但病情进展后，再次活检却符合淋巴瘤表现，请问有什么指标可以提示：肿大淋巴结是否会发展为淋巴瘤，或者说不会发展为淋巴瘤。
答：首先应根据临床病史，若短期进展较快，提高警惕，密切随访。
二是看淋巴结的完整度，若破坏较多，在排除恶性瘤的同时要提高注意。
三是免疫组化，非肿瘤免疫组化染色细胞有的是强的，有的是中等强的，有的是弱的，还有些阴性的，因为这些细胞含的抗原的量是不一样的，有的多，有的少，有的是没有的，这提示这些大细胞是处在不同分化阶段的，它含有不同的抗原，肿瘤的细胞往往是在某一个阶段出了问题，若变成了肿瘤，它的阳性程度差不了太多，不会这么明显，强、中、弱、阴性，好像有一个谱系似的，所以染个CD30、CD20可以辅助诊断。Kappa与Lmabda的克隆性及EB病毒的检测都可以有所提示。这是一个很大很复杂问题，难以在此全都说清。
问题11：临床上一般认为套细胞淋巴瘤属于侵袭性淋巴瘤，发展迅速，中位生存期2-3年，但近年有文献报道10%套细胞淋巴瘤属于惰性范畴，进展缓慢，我在临床上碰到1例套细胞淋巴瘤患者，病程已5年余，虽未达完全缓解，但一般情况良好，请教周教授，惰性的套细胞淋巴瘤和传统意义上的套细胞淋巴瘤在病理免疫表型上有无区别？
答：套细胞淋巴瘤在病理学上属于中等恶性程度的淋巴瘤，通常在疾病的第一年病情进展较为缓慢，但一年以后，病情往往发展迅速，表现为侵袭性淋巴瘤；当病变进一步进展，可发展为高度恶性淋巴瘤。可以通过染一个CD21，看FDC网的完整度，若网较大较广泛，将瘤细胞完全包裹在内，限制肿瘤的扩展，一般生存期会很长，另外，Ki67值大于40%，预后较差，核分裂37/10HPF.及存在母细胞化均会使中位生存期明显缩短。
